濟南免疫親和柱是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合原理的高效目標(biāo)分子提取技術(shù)。近年來,它在生物工程、臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。 一、原理
利用抗原與抗體之間的高度特異性結(jié)合。將特異性抗體固定在柱子的內(nèi)表面,當(dāng)含有目標(biāo)抗原的樣品通過柱子時,抗原與抗體結(jié)合形成復(fù)合物,從而實現(xiàn)目標(biāo)分子的捕獲與分離。后續(xù)通過適當(dāng)?shù)南疵摋l件,可以將目標(biāo)分子從柱子上解離并收集。
二、制備
選擇合適的抗體:針對目標(biāo)分子,選擇具有高特異性、高親和力的抗體。
抗體固定化:將抗體通過共價鍵合、吸附或包埋等方法固定在柱子的內(nèi)表面,確??贵w在柱內(nèi)的穩(wěn)定性和重復(fù)使用性。
柱子填充與平衡:將固定化抗體填充到空柱中,然后用適當(dāng)?shù)木彌_液進行平衡,確保柱子達(dá)到較佳的分離條件。
三、目標(biāo)分子的提取步驟
樣品處理:根據(jù)目標(biāo)分子的性質(zhì),對樣品進行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,如過濾、離心、濃縮等,以提高提取效率。
上樣:將處理好的樣品加載到濟南免疫親和柱上,使目標(biāo)分子與柱內(nèi)抗體結(jié)合。
洗滌:用適當(dāng)?shù)南礈炀彌_液沖洗柱子,去除未結(jié)合的雜質(zhì)分子。
洗脫:使用特定的洗脫緩沖液或競爭劑,將目標(biāo)分子從柱子上解離并收集。
濃縮與純化:對洗脫得到的目標(biāo)分子進行濃縮和純化,以滿足后續(xù)實驗或應(yīng)用的需求。
四、優(yōu)勢
高效:利用抗原-抗體特異性結(jié)合,可實現(xiàn)目標(biāo)分子的高效提取。
純度高:通過特異性結(jié)合和洗滌步驟,可有效去除雜質(zhì),提高目標(biāo)分子的純度。
操作簡便:濟南免疫親和柱操作簡單,易于掌握和推廣。